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猴结核杆菌抗体(TB-Ab)酶联免疫试剂盒
产品编号:YD-16002
产品名称 猴结核杆菌抗体(TB-Ab)酶联免疫试剂盒 
编号 YD-16002 
猴结核杆菌抗体(TB-Ab)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科 学研究,不得用于医学诊断,具体各指标使用说明书请联系客服索取,本模板为通用模板,仅供参考。

试剂盒检测原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本 抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最 终的黄色。
颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保 存方法
1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何 细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20 ℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属 于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不 用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.  浓度为0的 S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实 际浓度。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺 序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成 
名称                   96孔配置      48孔配置     备注
微孔酶标板         12孔×8条     12孔×4条    无
样本稀释液         6mL              3mL           无
检测抗体-HRP    10mL            5mL           无
20×洗涤缓冲液   25mL           15mL          按说明 书进行稀释
底物A                 6mL             3mL            无
底物B                 6mL             3mL            无
终止液                6mL             3mL            无
封板膜                2张               2张             无
说明书                1份               1份             无
自封袋                1个               1个             无
注:标准品浓度都不相同,麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备:
20×洗涤缓冲液的稀 释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液 ,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板 条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准 品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.  样本孔先 加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.  除空白孔 外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔 ,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体 ,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用 洗板机洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育 15min。
7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm 波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准 品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能
1. 准确性:标准品 线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:最低检 测浓度小于(参考说明书)
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反 应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
免责声明
1.  试剂盒仅 供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
    严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者 承担。
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